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痰消化液(胰酶消化法)

点击次数:5820 日期:2020/5/26 9:49:11

痰液、体液、粪便等组织样本是常用的微生物学检验样本,常含有多种微生物成分,
且自身成分复杂。由于结核分歧杆菌对营养的要求高、生长缓慢,培养时若标本中含有其他
杂菌,杂菌一般生长较快、易消耗营养,不利于结核分歧杆菌的检出。因此对于可能含有杂
菌的样本(如痰标本、消化道标本、支气管肺泡灌洗液和经支气管吸出液等),培养前均需
要对其进行前处理以液化标本、杀死杂菌。尿液、尸检组织和其他任何污染的液体标本,均
在培养前进行去污处理,而血、脑脊液、关节液等来自机体无菌部位的无杂菌污染的标本,
可以直接离心后取沉淀接种。
常用的标本前处理消化试剂有硫酸、氢氧化钠、N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC)、苯扎溴铵、草酸、胰酶、二硫苏糖醇等。痰消化液(胰酶消化法)主要由胰蛋白酶和磷酸盐等组成,ph为 7.6,经无菌处理,是痰液样本均质化操作的常用方法。本产品仅供科研使用。
痰消化液自备材料:
1、痰液、体液、粪便等组织样本
2、生理盐水、PBS
3、接种环
4、离心管、离心机
5、培养基
6、剪刀、研钵
痰消化液操作步骤(仅供参考):
(一)痰液样本:
1、挑起约 5ml浓痰液至已标记的 50ml离心管中。
2、加入等量的痰消化液进行均质化处理,涡旋震荡 20s,30-37℃静置 15-20min。
3、加入无菌 PBS(pH6.8 左右)至约 50ml,3000r/min 离心 15min。
4、倒掉上清液,添加 PBS1~3ml 。
(二)体液样本:
1、 无菌体液直接接种。取 10ml 体液于离心管中离心,取沉淀物直接接种。
2、 污染的体液操作同痰液标本。
(三)组织样本:
取 1g 组织用剪刀剪碎加入 5ml 培养基,用研钵将组织制作成匀浆,加入 50ml离心管
中。以下操作同痰液标本。
(四)粪便样本:
取 1g 粪便加入到 50ml离心管中,并向其中加入 5ml培养基,混匀。以下操作同痰液
标本。
痰消化液注意事项:
1、 痰液样本易在清晨采集,采集前先以冷开水充分漱口,以免口腔正常菌群污染样本。
2、 尿液样本易收集早晨第一次尿的中段尿为宜。
3、 样本采集后应立即送检。
4、 如样本用于结合杆菌的检查,痰量要多。
5、 肺部感染的样本可能患有菌血症,应同时做血液培养。
有效期: 12 个月有效。-20℃保存。4℃可短期保存。

原创作者:青岛捷世康生物科技有限公司

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